next up previous
Next: Hybrydyzacja typu northern Up: Skrypt do ćwiczeń Previous: Elektroforeza białek w żelu

TRANSFORMACJA DROŻDZY Saccharomyces cerevisiae

1. zaszczepić hodowlę drożdży w 50 ml. pożywki płynnej YPD

2. Następnego dnia zaszczepić hodowlą nocną świeżą hodowlę w stosunku 1:10, hodować przez około 3 h. aż OD osiągnie wartość 0.4-0.6

3. komórki zwirować w porcjach po 50 ml. przy 1000xg przez 5 min. w temp. pokojowej, usunąć supernatant

4. pelet zawisić w wodzie i ponownie zwirować, usunąć supernatant

5. zawiesić komórki w 1.5 ml świeżo przygotowanego 1xTE/LiAc

6. do probówek w których będzie prowadzona transformacja dodać 0.1 ug plazmidu i 0.1 mg. DNA nośnikowego, zamieszać

7. następnie dodać po 0.1 ml. komórek



Piotr Kozbial
2000-07-02