Next: dla starterów do genu Up: Materiały i metody Previous: Izolacja genomowego DNA roślin Spis rzeczy

Łańcuchowa reakcja polimerazy (PCR)

W celu potwierdzenia transgenicznego fenotypu molekularnego linii komórkowych BY-2 przeprowadzano reakcję PCR z wykorzystaniem polimerazy termostabilnej Deep Vent (1 U) (New England Biolabs), lub Taq (2 U) (Qiagen). Reakcja prowadzona była w objętości 50 $mu$ l, przy następujących warunkach: 3 minuty 94 $^{o}$ C, 30 cykli (30 s 94 $^{o}$ C, 30 s 60 $^{o}$ C, 2 min 72 $^{o}$ C), 5 min 72 $^{o}$ C. Sekwencja starterów (primerów) używanych do reakcji była następująca:

Subsections

- - dla starterów do genu fosfotransferazy neomycyny (genu KAN, nptII):
  - dla starterów do fragmentu genu fosfotransferazy higromycyny (HPT):

Tomasz Calikowski 2000-06-15