Spis rzeczy

• Spis rzeczy
• Wstęp
  • Organizacja chromatyny
    • Histony i nukleosomy
    • Ogony histonów i oddziaływania z innymi białkami
    • Kowalencyjne modyfikacje histonów
    • Składanie nukleosomów w chromatynie
    • Nukleosomy jako regulatory transkrypcji
    • Wielobiałkowe maszyny komórkowe zaangażowane w przebudowę struktur chromatynowych
    • Wyspecjalizowane aktywujące i reprymujące kompleksy białkowe, potrzebne do podtrzymywania struktury chromatyny i wzoru ekspresji genów
  • Biologiczna rola histonu H1
    • Histon H1 jako specyficzny regulator ekspresji genów
• Materiały i metody
  • Hodowla bakterii
  • Roślinny materiał biologiczny
  • Pożywki do hodowli roślin i komórek roślinnych
    • Pożywka MS do hodowli komórek BY-2 (MS-BY-2) (na 1 l) (Nagata i wsp., 1992).
    • Pożywka MS do hodowli tytoniu w płynnej kulturze (na 1l) (Murashige i Skoog, 1962).
    • Pożywka MST do hodowli młodych nieukorzenionych siewek roślin (na 1l).
    • Antybiotyki selekcyjne dla roślin (stężenie końcowe)
  • Hodowla roślin i komórek tytoniu
    • Hodowla roślin tytoniu w warunkach sterylnych
    • Sterylizacja nasion tytoniu do hodowli w podłożu płynnym
    • Hodowla roślin tytoniu w warunkach szklarniowych
    • Hodowla zawiesiny komórkowej BY-2
  • Przygotowanie bakterii kompetentnych Escherichia coli i ich transformacja metodą szoku cieplnego lub przez elektroporację.
  • Izolacja plazmidowego DNA bakterii
    • Izolacja plazmidowego DNA z Escherichia coli na małą skalę (miniprep), za pomocą lizy alkalicznej.
  • Izolacja fragmentów DNA z żelu agarozowego.
  • Rekombinacja DNA
  • Transformacja roślin i komórek tytoniu BY-2 via Agrobacterium tumefaciens
    • Transformacja krążków liściowych tytoniu
    • Transformacja siewek tytoniu
    • Transformacja komórek tytoniowej linii BY-2
  • Izolacja genomowego DNA roślin i komórek tytoniu.
  • Łańcuchowa reakcja polimerazy (PCR)
  • Hybrydyzacja Southerna
  • Ekstrakcja histonu H1 z roślin i komórek BY-2 tytoniu
    • Ekstrakcja całkowitych histonów z chromatyny
  • Trawienie chromatyny komórek BY-2 nukleazą Micrococcus
  • Elektroforeza białek
  • Metody mikroskopowe
    • Mikroskopia świetlna
    • Mikroskopia immunofluorescencyjna
    • Mikroskopia epifluorescencyjna
  • Fotografia komórek i roślin oraz obróbka komputerowa otrzymanych zdjęć
• Literatura
• About this document ...