Next:
Hodowla bakterii
Up:
Organizacja chromatyny i rola
Previous:
Histon H1 poza komórką
Spis rzeczy
Materiały i metody
Subsections
Hodowla bakterii
Szczepy bakterii
Pożywki do hodowli bakterii
Antybiotyki selekcyjne dla bakterii (stężenie końcowe)
Roślinny materiał biologiczny
Pożywki do hodowli roślin i komórek roślinnych
Pożywka MS do hodowli komórek BY-2 (MS-BY-2) (na 1 l) (Nagata i wsp., 1992).
Pożywka MS do hodowli tytoniu w płynnej kulturze (na 1l) (Murashige i Skoog, 1962).
Pożywka MST do hodowli młodych nieukorzenionych siewek roślin (na 1l).
Antybiotyki selekcyjne dla roślin (stężenie końcowe)
Hodowla roślin i komórek tytoniu
Hodowla roślin tytoniu w warunkach sterylnych
Sterylizacja nasion tytoniu do hodowli w podłożu płynnym
Hodowla roślin tytoniu w warunkach szklarniowych
Hodowla zawiesiny komórkowej BY-2
Przygotowanie bakterii kompetentnych Escherichia coli i ich transformacja metodą szoku cieplnego lub przez elektroporację.
Otrzymywanie kompetentnych bakterii Agrobacterium tumefaciens i ich transformacja poprzez elektroporację
Izolacja plazmidowego DNA bakterii
Izolacja plazmidowego DNA z Escherichia coli na małą skalę (miniprep), za pomocą lizy alkalicznej.
Izolacja plazmidowego DNA z Escherichia coli z wykorzystaniem systemu do oczyszczania
Izolacja plazmidowego DNA z Agrobacterium na małą skalę (miniprep).
Izolacja fragmentów DNA z żelu agarozowego.
Rekombinacja DNA
Transformacja roślin i komórek tytoniu BY-2 via
Agrobacterium tumefaciens
Transformacja krążków liściowych tytoniu
Transformacja siewek tytoniu
Transformacja komórek tytoniowej linii BY-2
Izolacja genomowego DNA roślin i komórek tytoniu.
Łańcuchowa reakcja polimerazy (PCR)
dla starterów do genu fosfotransferazy neomycyny (genu KAN, nptII):
dla starterów do fragmentu genu fosfotransferazy higromycyny (HPT):
Hybrydyzacja Southerna
Rozdział i transfer DNA
Znakowanie DNA metodą random priming
Prehybrydyzacja i hybrydyzacja
Ekstrakcja histonu H1 z roślin i komórek BY-2 tytoniu
Ekstrakcja całkowitych histonów z chromatyny
Trawienie chromatyny komórek BY-2 nukleazą Micrococcus
Elektroforeza białek
Elektroforeza białek w żelu poliakrylamidowym z dodatkiem SDS
Elektroforeza białek w żelu poliakrylamidowym z dodatkiem kwasu octowego i mocznika
Metody mikroskopowe
Mikroskopia świetlna
Mikroskopia immunofluorescencyjna
Mikroskopia epifluorescencyjna
Fotografia komórek i roślin oraz obróbka komputerowa otrzymanych zdjęć
Tomasz Calikowski 2000-06-15