Next:
Spis rzeczy
 
Spis rzeczy
Organizacja chromatyny i rola biologiczna histonu H1
(do internetu wprowadził - Piotr Koźbiał)
Przedstawiona poniżej praca została zaczerpnięta z rozprawy doktorskiej Tomasza Calikowskiego
Spis rzeczy
Wstęp
Organizacja chromatyny
Wprowadzenie
Histony i nukleosomy
Histony rdzeniowe i nukleosom
Histony łącznikowe
Ogony histonów i oddziaływania z innymi białkami
Kowalencyjne modyfikacje histonów
Ubikwitynacja histonów
Acetylacja histonów
Metylacja histonów
Fosforylacja histonów
Składanie nukleosomów w chromatynie
Nukleosomy jako regulatory transkrypcji
Wielobiałkowe maszyny komórkowe zaangażowane w przebudowę struktur chromatynowych
Wyspecjalizowane aktywujące i reprymujące kompleksy białkowe, potrzebne do podtrzymywania struktury chromatyny i wzoru ekspresji genów
Biologiczna rola histonu H1
Wprowadzenie
Histon H1 jako specyficzny regulator ekspresji genów
Histon H1 w cytoplazmie
Histon H1 poza komórką
Materiały i metody
Hodowla bakterii
Szczepy bakterii
Pożywki do hodowli bakterii
Antybiotyki selekcyjne dla bakterii (stężenie końcowe)
Roślinny materiał biologiczny
Pożywki do hodowli roślin i komórek roślinnych
Pożywka MS do hodowli komórek BY-2 (MS-BY-2) (na 1 l) (Nagata i wsp., 1992).
Pożywka MS do hodowli tytoniu w płynnej kulturze (na 1l) (Murashige i Skoog, 1962).
Pożywka MST do hodowli młodych nieukorzenionych siewek roślin (na 1l).
Antybiotyki selekcyjne dla roślin (stężenie końcowe)
Hodowla roślin i komórek tytoniu
Hodowla roślin tytoniu w warunkach sterylnych
Sterylizacja nasion tytoniu do hodowli w podłożu płynnym
Hodowla roślin tytoniu w warunkach szklarniowych
Hodowla zawiesiny komórkowej BY-2
Przygotowanie bakterii kompetentnych Escherichia coli i ich transformacja metodą szoku cieplnego lub przez elektroporację.
Otrzymywanie kompetentnych bakterii Agrobacterium tumefaciens i ich transformacja poprzez elektroporację
Izolacja plazmidowego DNA bakterii
Izolacja plazmidowego DNA z Escherichia coli na małą skalę (miniprep), za pomocą lizy alkalicznej.
Izolacja plazmidowego DNA z Escherichia coli z wykorzystaniem systemu do oczyszczania
Izolacja plazmidowego DNA z Agrobacterium na małą skalę (miniprep).
Izolacja fragmentów DNA z żelu agarozowego.
Rekombinacja DNA
Transformacja roślin i komórek tytoniu BY-2 via
Agrobacterium tumefaciens
Transformacja krążków liściowych tytoniu
Transformacja siewek tytoniu
Transformacja komórek tytoniowej linii BY-2
Izolacja genomowego DNA roślin i komórek tytoniu.
Łańcuchowa reakcja polimerazy (PCR)
Hybrydyzacja Southerna
Rozdział i transfer DNA
Znakowanie DNA metodą random priming
Prehybrydyzacja i hybrydyzacja
Ekstrakcja histonu H1 z roślin i komórek BY-2 tytoniu
Ekstrakcja całkowitych histonów z chromatyny
Trawienie chromatyny komórek BY-2 nukleazą Micrococcus
Elektroforeza białek
Elektroforeza białek w żelu poliakrylamidowym z dodatkiem SDS
Elektroforeza białek w żelu poliakrylamidowym z dodatkiem kwasu octowego i mocznika
Metody mikroskopowe
Mikroskopia świetlna
Mikroskopia immunofluorescencyjna
Mikroskopia epifluorescencyjna
Fotografia komórek i roślin oraz obróbka komputerowa otrzymanych zdjęć
Literatura
About this document ...
Tomasz Calikowski 2000-06-15